NKp44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407295

概要

NCR2は、活性化型のナチュラルキラー（NK）細胞受容体であるNKp44（CD336）をコードしている。NKp44はNK細胞の活性化に伴って誘導され、ITAMを有するアダプター分子TYROBP（DAP12）と会合してシグナルを伝達する。NKp44が細胞由来または病原体関連のリガンドと結合すると、NK細胞の脱顆粒やサイトカイン分泌が促進され、細胞傷害応答を形作る自然免疫の免疫監視経路に組み込まれる。NCR2の発現およびNKp44を介したシグナル伝達は、炎症性微小環境や、がん・慢性感染におけるNK細胞機能の変調など、免疫調節異常の文脈で研究されてきた。誘導性に発現する細胞表面受容体として、NKp44はNK細胞の活性化状態の解析や、他のNK受容体とのクロストークの解明にも用いられる。

NKp44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるNCR2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、NCR2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、NCR2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NKp44タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NKp44シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、NCR2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NKp44の機能に不可欠なNCR2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、NCR2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NKp44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNKp44 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、NCR2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NKp44 HDRプラスミド（h）および NKp44 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはNCR2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のNCR2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。