NICE4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411379

概要

UBAP2L（NICE4）は、RNA結合能とユビキチン結合ドメインを有するタンパク質をコードしており、細胞質のリボ核タンパク質（RNP）顆粒に局在して転写後段階での遺伝子発現制御に寄与します。ストレス顆粒の形成やRNA代謝への関与が示唆されており、タンパク質毒性ストレスや酸化ストレスに対する細胞の適応を支える一方で、増殖や生存に関わるプログラムにも影響します。これらの機能を通じて、UBAP2LはmRNA翻訳および安定性を制御する経路と関連し、その発現異常はがんに伴う増殖能や転移性表現型に関する研究でも報告されています。NICE4の機能を解明することは、RNA顆粒ダイナミクスとユビキチン関連シグナルがどのように協調して、疾患生物学に関わる細胞状態の遷移を制御するのかを明らかにする助けとなります。

NICE4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUBAP2L遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UBAP2L内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UBAP2Lのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NICE4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NICE4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UBAP2L欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NICE4の機能に不可欠なUBAP2Lエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UBAP2Lゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NICE4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびNICE4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UBAP2L遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NICE4 HDRプラスミド（h）および NICE4 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUBAP2Lホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUBAP2L標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。