Plasmide Double Nickase (m) NFATc1: sc-421863-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) NFATc1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide NFATc1 Double Nickase (m) et le plasmide NFATc1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nfatc1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: NFATc1 Antibody (7A6): sc-7294
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) NFATc1 | sc-421863-NIC | 20 µg | $410.00 |
Nfatc1 code le facteur de transcription NFATc1, un membre de la famille NFAT régulé par le calcium/la calcineurine, qui intègre la signalisation Ca²⁺ à des programmes transcriptionnels contrôlant l’activation immunitaire et le remodelage tissulaire. Dans les cellules de souris, NFATc1 est rapidement induit en aval de la signalisation du récepteur des cellules T et coopère avec AP-1 pour réguler des gènes de cytokines, des états de différenciation et des réseaux transcriptionnels dépendants de l’activation. Au-delà des lymphocytes, NFATc1 contribue à l’ostéoclastogenèse et à la résorption osseuse via des voies induites par RANKL, et s’articule avec les signalisations MAPK et NF-κB pour façonner l’expression génique spécifique de lignée. Une activité dérégulée de NFATc1 a été associée, dans des modèles précliniques, à des phénotypes inflammatoires et à des processus de remodelage pertinents pour des pathologies de type auto-immun, des mécanismes de perte osseuse et la signalisation du microenvironnement tumoral.
NFATc1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nfatc1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nfatc1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nfatc1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nfatc1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.