Plásmido Doble Nickase (h) Neurophysin I: sc-410922-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Neurophysin I consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Neurophysin I (h) y el plásmido de doble nickasa Neurophysin I (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a OXT. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Neurophysin I | sc-410922-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Neurophysin I | sc-410922-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen humano **OXT** codifica la prepropéptido de oxitocina, que se procesa para generar el nonapéptido oxitocina y su proteína transportadora, la **neurofisina I**; en conjunto, estas moléculas favorecen la maduración, estabilización y secreción regulada del péptido desde el sistema neurohipofisario. La señalización de la oxitocina actúa principalmente a través del receptor de oxitocina, activando la movilización de calcio dependiente de **Gq/PLCβ** y vías **MAPK** aguas abajo, lo que influye en programas neuroendocrinos de liberación y en respuestas contráctiles y secretoras específicas de cada tejido. En el sistema nervioso, la señalización vinculada a OXT contribuye a la modulación de circuitos que regulan conductas sociales y relacionadas con el estrés, mientras que sus acciones periféricas se integran con la fisiología reproductiva y metabólica. La desregulación de las vías oxitocinérgicas y del procesamiento del péptido se ha investigado en fenotipos del neurodesarrollo y psiquiátricos, así como en trastornos que afectan la función hipotalámico-hipofisaria, lo que convierte a **OXT** en una diana relevante para estudios mecanísticos de la biología de los neuropéptidos.
Neurophysin I El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus OXT en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de OXT. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de OXT. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con OXT alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.