nestin Lentiviral Activation Particles (h): sc-400156-LAC

ヒトNESは、神経幹／前駆細胞や、その他の増殖性で未分化な細胞状態を標識するクラスVI中間径フィラメントタンパク質であるネスチンをコードする。ネスチンは、有糸分裂、遊走、系譜決定の過程における細胞骨格の構築と細胞力学に寄与し、増殖因子シグナル伝達と協調して進む細胞骨格リモデリング・プログラムと機能的に連携する。NESの発現は発生過程で動的に制御され、組織修復や細胞ストレス応答時には再誘導されるが、これは前駆細胞様の転写プログラムの変化を反映している。ネスチン発現の破綻は、腫瘍細胞の可塑性や浸潤性表現型としばしば関連するため、幹細胞性、分化、ならびにがん生物学の研究における有用な分子指標となっている。

nestin レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なNESの発現上昇を可能にします。

nestin レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、NES転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性nestinの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のNESゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。