NERF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405891

개요

ELF2는 ETS 계열 전사인자인 NERF를 암호화하며, 퓨린이 풍부한 DNA 모티프에 결합해 조혈 분화, 면역세포 활성화, 계통(라인리지) 특이적 전사 네트워크를 제어하는 유전자 발현 프로그램을 조절합니다. NERF는 RNA 중합효소 II 의존적 전사에 관여하고, 다른 전사인자 및 크로마틴 조절인자들과 협력해 프로모터와 인핸서 활성을 조절합니다. ELF2/NERF 신호전달의 이상 조절은 혈액학적 환경에서 증식 및 생존 경로의 변화와 연관되어 있으며, 백혈병 발생 및 면역 조절 이상 연구에서 그 중요성이 뒷받침됩니다. 핵 조절 인자로서 NERF는 ETS 구동 전사 회로와 그 하위 경로 재구성을 분석하기 위한 핵심 노드로도 활용됩니다.

NERF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ELF2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ELF2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ELF2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NERF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NERF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ELF2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NERF 기능에 중요한 ELF2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ELF2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NERF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NERF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ELF2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NERF HDR 플라스미드 (h) 및 NERF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ELF2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ELF2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.