Nectin 2 Double Nickase Plasmid (h): sc-401994-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Nectin 2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Nectin 2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Nectin 2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf NECTIN2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Nectin 2: sc-271236
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Nectin 2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401994-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Nectin 2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401994-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NECTIN2 kodiert Nectin-2 (CD112), ein immunglobulinähnliches Zelladhäsionsmolekül, das an Adherens Junctions lokalisiert ist und dort Ca2+-unabhängige Zell-Zell-Kontakte, epitheliale Polarität sowie die Organisation des Zytoskeletts über Afadin und durch Crosstalk mit Cadherin‑Catenin‑Komplexen koordiniert. Nectin-2 ist an der Ausbildung von Zellkontakten, Migration und Gewebemorphogenese beteiligt und fungiert zudem als Ligand für Immunrezeptoren wie TIGIT, CD226 (DNAM‑1) und CD96, wodurch Adhäsionsbiologie mit Immunerkennung verknüpft wird. Eine veränderte NECTIN2-Expression wurde in verschiedenen entzündlichen und onkogenen Kontexten beschrieben und wird hinsichtlich ihres Einflusses auf Tumor‑Immun‑Interaktionen, metastatisches Verhalten und Barriereintegrität untersucht. Diese Eigenschaften machen NECTIN2 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Signalwege zu analysieren, die adhäsionsabhängige Signalgebung, die Modulation von Immun-Checkpoints und epithel‑mesenchymale Dynamiken steuern.
Nectin 2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des NECTIN2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von NECTIN2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die NECTIN2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit NECTIN2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.