NDST1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404078

개요

NDST1(N-deacetylase/N-sulfotransferase 1)은 헤파란 황산 프로테오글리칸 생합성 과정에서 N-황산화를 개시하고 진행시키는 핵심적인 골지체 상주 효소로, 리간드 결합 특이성을 결정하는 황산화 패턴을 형성합니다. NDST1은 헤파란 황산의 구조를 조절함으로써 세포외기질의 조직화와 세포 표면 공동수용체(co-receptor) 기능을 조절하고, FGF, WNT, Hedgehog, VEGF 축을 포함한 성장인자 및 모포젠 신호전달 경로에 영향을 미칩니다. 이러한 황산화 의존적 상호작용은 발생과 조직 항상성의 핵심인 세포 부착, 이동, 분화 프로그램에 영향을 줍니다. NDST1 활성의 이상 조절과 헤파란 황산 조성 변화는 종양 미세환경 재구성, 섬유화 관련 신호전달, 신경발달성 표현형 등 다양한 병태생리와 연관되어 있으며, 따라서 NDST1은 글리코칼릭스 기반 신호전달의 기전을 연구하는 데 유용한 표적이 됩니다.

NDST1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NDST1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NDST1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NDST1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NDST1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NDST1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NDST1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NDST1 기능에 중요한 NDST1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NDST1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NDST1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NDST1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NDST1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NDST1 HDR 플라스미드 (h) 및 NDST1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NDST1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NDST1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.