Nanos2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404123

개요

NANOS2는 생식세포 운명을 전사 후 수준에서 조절하는, 진화적으로 보존된 RNA 결합 단백질인 Nanos2를 암호화합니다. 인간 생물학에서 NANOS2는 mRNA의 안정성과 번역을 조절함으로써 정원세포(spermatogonia) 분화 프로그램을 촉진하는 동시에 비정상적인 감수분열 진입을 억제하여 남성 생식계통 정체성의 유지를 돕는 것으로 알려져 있습니다. 또한 그 기능은 생식계통 조절 네트워크 및 RNA 과립(RNA granule) 관련 과정과 교차하며, 이는 생식자 형성 과정(gametogenesis) 동안 전사체 재구성을 형성하는 데 기여합니다. NANOS 계열 단백질이 관여하는 생식세포 발달 경로의 조절 이상은 불임, 생식샘 발달 이상, 그리고 생식세포 종양 생물학 연구와 관련이 있습니다.

Nanos2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NANOS2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NANOS2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NANOS2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Nanos2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Nanos2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NANOS2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Nanos2 기능에 중요한 NANOS2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NANOS2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Nanos2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Nanos2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NANOS2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Nanos2 HDR 플라스미드 (h) 및 Nanos2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NANOS2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NANOS2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.