NAIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418189

Visão geral

A NAIP (proteína inibitória de apoptose da família NLR) é um recetor citosólico humano do tipo NOD que contribui para a deteção imunitária inata e para a regulação da sobrevivência celular. Participa em processos relacionados com o inflamassoma ao reconhecer ligandos bacterianos específicos e ao apoiar a ativação de vias de caspases inflamatórias, influenciando a maturação de citocinas da família IL-1 e respostas piroptóticas. Por meio destas funções, a NAIP cruza-se com a sinalização de NF-κB, mecanismos de defesa do hospedeiro contra agentes patogénicos e respostas de stress celular que moldam a homeostase inflamatória. A expressão ou função desregulada da NAIP tem sido associada a alterações na sinalização inflamatória em infeções e em patologia mediada pelo sistema imunitário, tornando-a um alvo relevante para estudos mecanísticos de inflamação e morte celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO NAIP (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NAIP em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NAIP, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NAIP na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína NAIP.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NAIP para a investigação da sinalização de NAIP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NAIP críticos para a função NAIP
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NAIP para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo NAIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo NAIP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NAIP. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo NAIP Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR NAIP (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NAIP para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NAIP definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.