Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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NaBC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405950
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- NaBC1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico NaBC1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: NaBC1 Anticuerpo (B-12): sc-393808
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
NaBC1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405950 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
BCAS1 (proteína 1 asociada a la mielina enriquecida en el cerebro), también conocido como NaBC1, es un gen humano con expresión enriquecida en el sistema nervioso central y se utiliza ampliamente como marcador de células del linaje de los oligodendrocitos y de la mielinización activa. Su expresión se asocia con programas de diferenciación de oligodendrocitos y de formación de mielina, lo que lo vincula a procesos celulares que gobiernan el aislamiento de los axones y la maduración de la sustancia blanca. Se han descrito alteraciones en la expresión de BCAS1/NaBC1 en estudios realizados en contextos desmielinizantes y neurodegenerativos, lo que respalda su relevancia para investigar los mecanismos de pérdida y reparación de la mielina. Como factor asociado al linaje, BCAS1 proporciona un punto de entrada para desentrañar las redes transcripcionales y de proteostasis que moldean las transiciones de estado de los oligodendrocitos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO NaBC1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen BCAS1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del BCAS1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de BCAS1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína NaBC1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en BCAS1 para la investigación de la señalización de NaBC1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de BCAS1 críticos para la función de NaBC1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de BCAS1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido NaBC1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido NaBC1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus BCAS1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR NaBC1 (h) y el plásmido HDR NaBC1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología BCAS1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana BCAS1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.