NAB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437362

概要

NAB2（NGFI-A結合タンパク質2）は核内の転写共役制御因子で、EGRファミリー転写因子に結合し、刺激応答性の遺伝子発現プログラムを調節します。即時早期遺伝子の転写やクロマチン依存的な制御ダイナミクスに影響を及ぼすことで、NAB2は細胞増殖・分化・ストレス適応応答を制御する経路に寄与します。NAB2/EGRシグナルの制御異常は、増殖関連および線維化関連遺伝子の発現パターンの変化と関連づけられており、ラットモデルにおける組織リモデリングや疾患に伴う転写プログラムの再配線の機序研究において重要です。したがってNAB2は、細胞外からのシグナルが状況依存的な転写出力へと変換される仕組みを解明するうえで有用な結節点となります。

NAB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、NAB2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、NAB2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• NAB2の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• NAB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびNAB2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  NAB2 HDRプラスミド（r）および NAB2 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。