MZT2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406507

概要

MZT2B（有糸分裂紡錘体構築タンパク質2B）は、中心体に局在する小型の中心体タンパク質をコードしており、中心体におけるγ-チューブリンリング複合体（γTuRC）および関連因子を介して微小管の組織化に関与します。γ-チューブリン依存的な微小管核形成を支えることで、MZT2Bは紡錘体形成、中心体機能、有糸分裂時の正確な染色体分配に寄与します。中心体および紡錘体の制御ネットワークの破綻はゲノム不安定性の一般的な特徴であり、そのためMZT2B関連経路は、がん生物学や増殖ストレスモデルで頻繁に研究される細胞周期制御異常と結び付けて考えられます。したがってMZT2Bは、中心体恒常性、有糸分裂の進行、ならびに微小管依存的な輸送過程を検討するうえで重要な分子です。

MZT2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMZT2B遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MZT2B内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MZT2Bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MZT2Bタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MZT2Bシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MZT2B欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MZT2Bの機能に不可欠なMZT2Bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MZT2Bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MZT2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMZT2B CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MZT2B遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MZT2B HDRプラスミド（h）および MZT2B HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMZT2Bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMZT2B標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。