Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406184

概要

MYOZ3は、横紋筋においてZディスクに局在するタンパク質であるミオゼニン3をコードし、構造要素とシグナル伝達複合体を結び付けることでサルコメアの組織化に寄与します。ミオゼニンファミリーのメンバーはαアクチニンやカルシニューリン–NFATシグナルの調節因子と相互作用することから、MYOZ3は、機械的負荷を転写リモデリングおよび筋線維の維持へと結び付ける経路に関与すると考えられます。Zディスク構造とカルシニューリン依存性シグナルの破綻は、骨格筋および心筋における筋原線維の完全性、収縮性、ならびにストレス適応応答の研究と関連します。したがってMYOZ3は、筋生物学および関連する疾患モデル系における、細胞骨格とシグナル伝達のクロストークを解析するうえで有用な標的となります。

Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるMYOZ3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、MYOZ3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、MYOZ3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Myozenin 3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Myozenin 3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、MYOZ3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Myozenin 3の機能に不可欠なMYOZ3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、MYOZ3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Myozenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMyozenin 3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、MYOZ3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Myozenin 3 HDRプラスミド（h）および Myozenin 3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはMYOZ3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のMYOZ3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。