Myosin IIIb CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-414483

개요

MYO3B는 액틴 의존적 모터 단백질인 미오신 IIIb를 암호화하며, ATP 가수분해를 F-액틴을 따라 이동하는 운동으로 연결하고 세포골격 재구성에 관여합니다. 미오신 III 계열 단백질은 막 돌출부의 동역학과 액틴 다발의 조직을 조절하는 데 관여하는 것으로 알려져 있으며, 이는 세포 극성, 소포 수송, 신호 의존적 세포 구조 변화의 핵심 과정입니다. 이러한 역할을 통해 MYO3B는 이동과 부착 같은 액틴 구동 세포 행동을 지지하며, 이는 세포골격 장력 및 기계적 신호전달(mechanotransduction)을 조절하는 경로와 맞물립니다. 액틴–미오신 네트워크의 조절 이상은 상피 무결성과 신경감각 세포 구조와 관련된 질환 전반과 폭넓게 연관되므로, MYO3B는 세포골격 제어 기전을 연구하기 위한 유용한 표적입니다.

Myosin IIIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MYO3B 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MYO3B 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MYO3B의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Myosin IIIb 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Myosin IIIb 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MYO3B 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Myosin IIIb 기능에 중요한 MYO3B 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MYO3B 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Myosin IIIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Myosin IIIb CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MYO3B 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Myosin IIIb HDR 플라스미드 (h) 및 Myosin IIIb HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MYO3B 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MYO3B 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.