MYL3 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421787-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MYL3O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MYL3 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MYL3 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Myl3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MYL3 Anticorpo (MLM527): sc-58804
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MYL3 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421787-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MYL3 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421787-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Myl3 codifica a cadeia leve 3 da miosina (MYL3), um componente regulatório essencial da miosina do músculo estriado que estabiliza o braço de alavanca e ajusta o ciclo de pontes cruzadas actina–miosina durante a contração. No músculo cardíaco e no músculo esquelético de contração lenta (fibras lentas) de camundongo, a MYL3 contribui para a montagem do sarcômero, a cinética contrátil e a mecanotransdução em vias que conectam o manuseio de cálcio, a organização miofibrilar e a demanda energética. Alterações nos níveis ou na sequência de MYL3 modificam o desempenho sarcomérico e têm sido associadas a fenótipos relacionados a cardiomiopatias e a disfunção miofibrilar mais ampla. Como resultado, Myl3 é amplamente utilizado em estudos de desenvolvimento muscular, contratilidade e relações genótipo-fenótipo em modelos de doença do músculo estriado.
MYL3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Myl3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Myl3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Myl3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Myl3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.