Plasmide Double Nickase (h) musculin: sc-403242-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) musculin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide musculin Double Nickase (h) et le plasmide musculin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MSC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: musculin Antibody (4D7): sc-293482
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) musculin | sc-403242-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) musculin | sc-403242-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène MSC humain code la musculine, un facteur de transcription à hélice-boucle-hélice basique (bHLH) qui régule des programmes d’expression génique contrôlant la spécification des lignages et la différenciation cellulaire. La musculine module la transcription via une liaison à l’ADN dépendante des boîtes E (E-box) et par interaction avec d’autres facteurs bHLH, ce qui l’associe à des voies du développement et du destin cellulaire influençant les états de prolifération et de maturation. Une expression altérée de MSC a été rapportée dans divers contextes impliquant une différenciation dérégulée et une reprogrammation transcriptionnelle, notamment des phénotypes associés au cancer ainsi que des changements d’état des cellules immunitaires ou stromales. Ces propriétés font de la musculine une cible utile pour des études mécanistiques du contrôle transcriptionnel, de l’identité cellulaire et des interactions entre voies de signalisation dans des modèles cellulaires humains.
musculin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MSC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MSC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MSC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MSC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.