musculin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403242

개요

MSC는 E-box 모티프에 결합하고 다른 bHLH 조절 인자들과 협력함으로써 계통(specification)을 규정하는 유전자 발현 프로그램을 조절하는 기본 helix–loop–helix(bHLH) 전사인자인 musculin을 암호화한다. Musculin은 발생 및 조직 특이적 맥락에서 세포 운명 결정, 분화 시점 조절, 전사 억제/활성화 역학을 제어하는 데 관여하는 것으로 알려져 있으며, 그 하위 효과로 증식과 표현형 안정성에도 영향을 미친다. MSC 발현의 변화는 암 관련 전사 재프로그래밍과 분화 상태 변화 등을 포함한 여러 질환 관련 상황에서 보고되어 왔으며, 유전자 조절 네트워크를 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 간주된다. Musculin의 기능을 규명하면 bHLH에 의해 구동되는 회로가 성장 조절 및 세포 정체성을 관장하는 경로들과 어떻게 맞물리는지 더 명확히 이해하는 데 도움이 된다.

musculin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MSC 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MSC 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MSC의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 musculin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 musculin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MSC 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• musculin 기능에 중요한 MSC 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MSC 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• musculin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 musculin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MSC 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  musculin HDR 플라스미드 (h) 및 musculin HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MSC 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MSC 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.