Mucin 6/MUC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402946

Visão geral

MUC6 codifica a mucina 6, uma mucina secretada, fortemente O-glicosilada e formadora de gel, que contribui para a barreira protetora de muco nas superfícies epiteliais. Por meio de suas extensas estruturas de glicanos e da formação de uma matriz polimérica, a MUC6 ajuda a regular a hidratação, a viscosidade e as interações com microrganismos e fatores luminais, moldando a homeostase mucosa e a defesa inata. Sua expressão está ligada à diferenciação epitelial e a programas de biossíntese de mucinas que se conectam às vias de glicosilação no RE/Golgi e a processos de manutenção da barreira. A desregulação da expressão de MUC6 e padrões alterados de glicosilação de mucinas estão associados a lesão inflamatória e remodelamento epitelial em doenças gastrointestinais e outras doenças relacionadas a mucosas, e são frequentemente avaliados como biomarcadores de linhagem e de estados de células mucosas em biologia do câncer.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Mucin 6/MUC6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MUC6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MUC6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MUC6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Mucin 6/MUC6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MUC6 para a investigação da sinalização de Mucin 6/MUC6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MUC6 críticos para a função Mucin 6/MUC6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MUC6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Mucin 6/MUC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Mucin 6/MUC6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MUC6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Mucin 6/MUC6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Mucin 6/MUC6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MUC6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MUC6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.