Plasmide Double Nickase (h) Mucin 1/MUC1: sc-416876-NIC

MUC1 code pour la mucine 1, une mucine transmembranaire de type I fortement O‑glycosylée, exprimée à la surface apicale de nombreux tissus épithéliaux, où elle contribue à la fonction barrière, à l’hydratation et à la protection contre le stress environnemental. Par l’intermédiaire de sa queue cytoplasmique, MUC1 s’insère dans des réseaux de signalisation qui régulent la polarité cellulaire, l’adhérence et les réponses transcriptionnelles, en interaction avec des voies telles que la signalisation des récepteurs à activité tyrosine kinase et les processus en aval associés à MAPK/PI3K. Des altérations de l’expression, de la localisation ou des glycoformes de MUC1 sont fréquemment liées à une désorganisation de l’épithélium et à des interactions immunitaires perturbées dans des contextes inflammatoires et néoplasiques. En conséquence, MUC1 est largement étudiée comme modulatrice de l’homéostasie épithéliale, de la biologie des cellules tumorales et de la signalisation du microenvironnement dépendante des mucines.

Mucin 1/MUC1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MUC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MUC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MUC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MUC1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.