Mts1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422782

개요

마우스 S100a4는 Mts1을 암호화하는데, Mts1은 칼슘 결합성 S100 계열 단백질로서 칼슘 의존적 액틴 재구성과 그에 연관된 신호 네트워크를 조절함으로써 세포골격 동역학, 세포 운동성, 세포–기질 상호작용을 조절한다. Mts1은 상피–간엽 전이(EMT), 섬유아세포 활성화, 면역세포 이동과 같은 과정과 연관되어 있으며, Rho GTPase 신호전달 및 세포외기질(ECM) 재구성과 관련된 경로와의 연결도 보고되어 있다. S100a4/Mts1 발현의 변화는 침윤성 및 이동 촉진(pro-migratory) 상태의 세포를 나타내는 분자적 지표로 자주 사용되며, 염증 관련 조직 재형성과 종양 생물학 모델에서 연구된다. 마우스 시스템에서는 S100a4가 기질–면역 간 상호작용과 병적 재형성에 대한 계통(lineage) 특이적 기여를 규명하는 데에도 활용된다.

Mts1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 S100a4 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 S100a4 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 S100a4의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Mts1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Mts1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 S100a4 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Mts1 기능에 중요한 S100a4 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 S100a4 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Mts1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Mts1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 S100a4 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Mts1 HDR 플라스미드 (m) 및 Mts1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 S100a4 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 S100a4 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.