Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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MTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400942
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MTA1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MTA1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MTA1 Anticorpo (E-12): sc-373765
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400942 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MTA1 (metastasis associated 1) codifica um correagulador associado à cromatina e um componente-chave do complexo NuRD (remodelamento de nucleossomos e desacetilase), integrando o remodelamento de nucleossomos dependente de ATP com a desacetilação de histonas para moldar programas transcricionais. Por meio de interações com HDAC1/2, CHD4 e fatores de transcrição específicos de sequência, o MTA1 influencia a transição epitélio–mesênquima, as respostas a danos no DNA, a sinalização de receptores hormonais e a regulação do ciclo celular. Alterações na expressão ou na atividade de MTA1 têm sido associadas à progressão tumoral e a fenótipos invasivos em múltiplos tipos de câncer, nos quais pode modular vias oncogênicas e de diferenciação. Como regulador nuclear do estado da cromatina, o MTA1 é frequentemente estudado na dinâmica de repressão/ativação transcricional, na plasticidade epigenética e nos mecanismos de expressão gênica associada à metástase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MTA1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MTA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MTA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MTA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MTA1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MTA1 para a investigação da sinalização de MTA1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MTA1 críticos para a função MTA1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MTA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MTA1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MTA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MTA1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MTA1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MTA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MTA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.