Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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mSHMT Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402609-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mSHMTO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mSHMT (h) e o Plasmídeo Double Nickase mSHMT (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SHMT2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mSHMT Anticorpo (F-11): sc-390641
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mSHMT Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402609-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mSHMT Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402609-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SHMT2 codifica a serina-hidroximetiltransferase mitocondrial (mSHMT), uma enzima dependente de PLP que catalisa a conversão reversível de serina em glicina, ao mesmo tempo que gera 5,10-metilenotetrahidrofolato no ciclo mitocondrial de um carbono. Essa atividade sustenta o metabolismo de um carbono mediado por folato, acoplando a interconversão de aminoácidos à biossíntese de nucleotídeos, à homeostase redox e à função mitocondrial. Por meio do seu papel em manter o suprimento de formiato para o pool citosólico de folato, o SHMT2 influencia a capacidade de replicação e reparo do DNA, bem como as respostas celulares ao estresse metabólico e oxidativo. A desregulação de vias ligadas ao SHMT2 tem sido associada a fenótipos proliferativos e metabólicos e é estudada em contextos que incluem o metabolismo tumoral e a disfunção mitocondrial.
mSHMT O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SHMT2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SHMT2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SHMT2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SHMT2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.