mSHMT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430789

개요

Shmt2는 미토콘드리아 세린 하이드록시메틸전이효소(mSHMT)를 암호화하며, mSHMT는 피리독살 인산(PLP) 의존성 효소로서 미토콘드리아의 원탄소(one-carbon) 대사 경로에서 세린과 글라이신 사이의 가역적 전환을 촉매하는 동시에 5,10-메틸렌-테트라하이드로폴레이트를 생성합니다. 이러한 활성은 뉴클레오타이드 생합성, 메틸화 반응, 그리고 NADPH 생성 및 미토콘드리아 대사와의 연계를 통한 산화환원 항상성에 필요한 원탄소 단위의 엽산 매개 전달을 지원합니다. SHMT2는 미토콘드리아 엽산 플럭스를 조절함으로써 빠르게 분열하는 세포에서 증식 프로그램, 산화 스트레스 반응, 대사 적응에 영향을 미칩니다. SHMT2 기능의 변화는 대사 재프로그래밍 및 유전체 유지 결함과 연관되어 왔으며, 이는 종양 생물학과 미토콘드리아 기능장애 연구와 관련이 있습니다.

mSHMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Shmt2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Shmt2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Shmt2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 mSHMT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 mSHMT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Shmt2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• mSHMT 기능에 중요한 Shmt2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Shmt2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• mSHMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 mSHMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Shmt2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  mSHMT HDR 플라스미드 (m) 및 mSHMT HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Shmt2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Shmt2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.