Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
MRCKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403169
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MRCKβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MRCKβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MRCKβ Anticorpo (C-12): sc-374597
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MRCKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403169 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CDC42BPB codifica a MRCKβ (quinase beta relacionada à quinase da distrofia miotônica, ligante de Cdc42), uma quinase de serina/treonina que atua a jusante da GTPase Rho CDC42 para coordenar a contratilidade actina–miosina. A MRCKβ fosforila reguladores do citoesqueleto, incluindo a cadeia leve de miosina, e influencia a polaridade celular, a formação de lamelipódios e a migração direcional por meio de redes de sinalização relacionadas a Rho/ROCK. Essas atividades conectam CDC42BPB a vias que governam a dinâmica de adesão, a morfogênese e o tráfego de vesículas, processos frequentemente perturbados em fenótipos invasivos e metastáticos. A sinalização alterada de MRCKβ tem sido estudada no contexto da motilidade de células tumorais e de outros distúrbios envolvendo desregulação do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MRCKβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CDC42BPB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CDC42BPB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CDC42BPB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MRCKβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CDC42BPB para a investigação da sinalização de MRCKβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CDC42BPB críticos para a função MRCKβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CDC42BPB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MRCKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MRCKβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CDC42BPB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MRCKβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MRCKβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CDC42BPB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CDC42BPB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.