MMS19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405964

Visão geral

MMS19 codifica a MMS19, um fator conservado implicado na manutenção do genoma por meio de suas funções na montagem citosólica de clusters ferro–enxofre (Fe–S) e na maturação de proteínas nucleares dependentes de Fe–S envolvidas na replicação e no reparo do DNA. Ao sustentar a integridade funcional de múltiplas enzimas do metabolismo do DNA, MMS19 contribui para a tolerância ao estresse replicativo, a sinalização da resposta a danos no DNA e a estabilidade cromossômica global. Assim, a perturbação de MMS19 é relevante para vias que protegem a integridade genômica e pode influenciar a sensibilidade celular a agentes genotóxicos. Processos ligados a MMS19 desregulados são de interesse em estudos sobre acúmulo de mutações, controle de checkpoints e mecanismos subjacentes aos fenótipos de instabilidade genômica observados em contextos associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MMS19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MMS19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MMS19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MMS19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MMS19.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MMS19 para a investigação da sinalização de MMS19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MMS19 críticos para a função MMS19
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MMS19 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MMS19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MMS19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MMS19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MMS19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MMS19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MMS19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MMS19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.