MKP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406250
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MKP-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MKP-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MKP-6 Anticorpo (4B5-E6): sc-517023
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MKP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406250 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A fosfatase de proteínas de dupla especificidade 14 (DUSP14), também conhecida como MKP-6, é uma fosfatase citoplasmática de MAPK que desfosforila resíduos de treonina e tirosina para atenuar a sinalização de MAPK. Ela modula principalmente vias responsivas a estresse e citocinas, incluindo as cascatas de JNK e p38 MAPK, moldando programas transcricionais a jusante que controlam proliferação, apoptose e respostas inflamatórias. Por atuar como reguladora de feedback negativo da atividade de MAPK, a DUSP14 ajuda a ajustar a amplitude e a duração do sinal em contextos imunes e epiteliais. A expressão ou atividade desregulada de DUSP14 tem sido associada a alterações na homeostase de sinalização observadas na biologia do câncer e em mecanismos de doenças imunomediadas, o que sustenta seu uso como um ponto nodal para estudos centrados em vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MKP-6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DUSP14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DUSP14, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DUSP14 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MKP-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DUSP14 para a investigação da sinalização de MKP-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DUSP14 críticos para a função MKP-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DUSP14 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MKP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MKP-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DUSP14. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MKP-6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MKP-6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DUSP14 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DUSP14 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.