MKP-1/DUSP1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422507

개요

이중 특이성 인산가수분해효소 1(Dusp1, MKP-1/DUSP1로도 알려짐)은 유도성 MAPK 인산가수분해효소로, 스트레스·사이토카인·성장인자 자극 후 ERK1/2, JNK, p38 MAPK를 탈인산화하여 불활성화함으로써 신호 지속 시간을 제한한다. 마우스 세포에서 DUSP1은 MAPK 활성을 염증, 세포사멸, 분화, 산화 및 유전독성 스트레스에 대한 적응을 조절하는 전사 프로그램과 연결하는 핵심 피드백 조절자로 기능한다. MAPK 의존적 전사인자와 그 하위의 사이토카인 출력의 조절을 통해 DUSP1은 선천면역 신호전달과 세포 스트레스 반응에 영향을 미친다. DUSP1의 발현 또는 활성의 조절 이상은 대사성 스트레스 및 종양성 스트레스를 포함한 여러 맥락에서 변형된 염증 표현형과 비정상적 MAPK 신호전달과 연관되어 왔으며, 이는 DUSP1이 경로 규명을 위한 기전적 허브(노드)로 활용될 수 있음을 뒷받침한다.

MKP-1/DUSP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dusp1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dusp1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dusp1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MKP-1/DUSP1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MKP-1/DUSP1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dusp1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MKP-1/DUSP1 기능에 중요한 Dusp1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dusp1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MKP-1/DUSP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MKP-1/DUSP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dusp1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MKP-1/DUSP1 HDR 플라스미드 (m) 및 MKP-1/DUSP1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dusp1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dusp1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.