Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Mitofilin Plasmide Double Nickase (h): sc-403617-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Mitofilin Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Mitofilin Double Nickase Plasmid (h) e il Mitofilin Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IMMT. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Mitofilin Antibody (D-3): sc-390707
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Mitofilin Plasmide Double Nickase (h) | sc-403617-NIC | 20 µg | $410.00 |
IMMT codifica mitofilina, una proteina essenziale della membrana mitocondriale interna e componente centrale del complesso MICOS, che organizza le giunzioni delle creste e mantiene l’ultrastruttura mitocondriale. Modellando l’architettura delle creste, la mitofilina supporta l’efficienza della fosforilazione ossidativa, la diffusione dei metaboliti e il corretto assemblaggio dei supercomplessi della catena respiratoria, collegando IMMT all’omeostasi bioenergetica e al controllo di qualità mitocondriale. L’organizzazione di membrana dipendente da IMMT si integra con la dinamica mitocondriale e la segnalazione da stress, influenzando processi come l’apoptosi e la mitofagia. La disregolazione del mantenimento delle creste e della funzione di MICOS è spesso studiata nel contesto della disfunzione mitocondriale osservata nella neurodegenerazione, nello stress cardiometabolico e nel metabolismo delle cellule tumorali.
Mitofilin Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IMMT nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IMMT. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IMMT. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IMMT interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.