Mitochondrial Topo I CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-408700

개요

TOP1MT는 미토콘드리아 DNA 토포이소머레이스 I를 암호화하며, mtDNA 복제와 전사 과정에서 발생하는 비틀림(토션) 스트레스를 일시적인 단일가닥 절단을 유도한 뒤 다시 봉합함으로써 해소하는 IB형 토포이소머레이스입니다. TOP1MT는 미토콘드리아 게놈의 위상 구조를 유지함으로써 미토콘드리아 유전자 발현, 뉴클레오이드 조직화, 그리고 산화적 인산화(OXPHOS) 능력을 뒷받침합니다. TOP1MT 기능의 장애는 mtDNA 무결성 변화, 호흡사슬 기능 저하, 미토콘드리아 스트레스에 대한 민감성 증가와 연관되어 왔습니다. 이러한 과정은 신경퇴행, 심장-대사 질환, 그리고 암세포 생물에너지학에서의 미토콘드리아 기능장애를 연구하는 데 중요합니다.

Mitochondrial Topo I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TOP1MT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TOP1MT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TOP1MT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Mitochondrial Topo I 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Mitochondrial Topo I 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TOP1MT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Mitochondrial Topo I 기능에 중요한 TOP1MT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TOP1MT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Mitochondrial Topo I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Mitochondrial Topo I CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TOP1MT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Mitochondrial Topo I HDR 플라스미드 (h) 및 Mitochondrial Topo I HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TOP1MT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TOP1MT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.