MiRP1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-418462

개요

KCNE2는 인간 MinK-related peptide 1(MiRP1)을 암호화하며, MiRP1은 단일 막관통형(transmembrane) β-보조소단위로서 KCNH2/hERG를 포함한 전압개폐성 칼륨 채널의 기능을 조절해 채널의 개폐(gating), 세포 내 수송(trafficking), 그리고 막 재분극을 정교하게 조율합니다. MiRP1은 심장 활동전위 지속시간과 상피 이온 수송에 영향을 줌으로써 심장과 위장관 상피 같은 조직에서 전기적 흥분성과 전해질 항상성 유지에 기여합니다. KCNE2 의존적 채널 조절이 교란되면 재분극 예비력(repolarization reserve)이 변화하고 부정맥 감수성이 증가하는 것과 연관되며, 갑상선 및 위(胃) 생리와의 관련성에 대해서도 연구되어 왔습니다. 조절 소단위로서 MiRP1은 이온 채널 거대분자 복합체, 막단백질 품질관리, 그리고 자극 의존적 흥분성 변화의 기전을 규명하는 데 유용한 기계론적 접근 지점을 제공합니다.

MiRP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 KCNE2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 KCNE2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 KCNE2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MiRP1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MiRP1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 KCNE2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MiRP1 기능에 중요한 KCNE2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 KCNE2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MiRP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MiRP1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 KCNE2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MiRP1 HDR 플라스미드 (h) 및 MiRP1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 KCNE2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 KCNE2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.