MIP-3β CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403239

개요

CCL19는 케모카인 MIP-3β(또는 CCL19로도 알려짐)를 암호화하며, 이는 CCR7의 리간드로서 미경험(naïve) T 세포, 중심기억 T 세포, 성숙 수지상세포가 림프조직으로 이동하도록 유도하는 주화성(chemotaxis)을 지휘합니다. 백혈구 이동 경로를 형성함으로써 림프절 호밍, 면역 시냅스 형성, 그리고 T 세포 구역 내에서의 조율된 항원 제시를 지원합니다. MIP-3β–CCR7 신호전달은 세포골격 재구성, 부착, 이동 극성화를 조절하는 GPCR 매개 경로들과 교차하며, 이차 림프기관의 구조와 기능에 영향을 미칩니다. CCL19 발현 또는 신호전달의 이상은 만성 염증, 자가면역, 종양 미세환경에서의 면역세포 침윤 양상 변화와 연관되어 왔으며, 기전 면역학 연구에서 유용한 표적으로 간주됩니다.

MIP-3β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CCL19 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CCL19 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CCL19의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MIP-3β 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MIP-3β 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CCL19 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MIP-3β 기능에 중요한 CCL19 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CCL19 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MIP-3β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MIP-3β CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CCL19 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MIP-3β HDR 플라스미드 (h) 및 MIP-3β HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CCL19 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CCL19 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.