MIP-1α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422843
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MIP-1α O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MIP-1α, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MIP-1α Anticorpo (C-5): sc-365691
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MIP-1α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422843 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccl3 codifica a proteína inflamatória de macrófagos-1α (MIP-1α), uma quimiocina CC que coordena o recrutamento e a ativação de leucócitos durante respostas imunes inatas e adaptativas. A MIP-1α sinaliza principalmente por meio de CCR1 e CCR5 para promover a quimiotaxia de monócitos/macrófagos, células T e células NK, integrando-se a programas inflamatórios mediados por NF-κB e a redes de citocinas/quimiocinas. Em modelos murinos, Ccl3 é amplamente utilizado para investigar o tráfego de células inflamatórias, estados de ativação mieloide e remodelamento tecidual. A produção desregulada de MIP-1α é frequentemente associada à inflamação crônica e à patologia mediada pelo sistema imune, tornando-a um nó-chave para estudar sinais do microambiente em infecções, autoimunidade e imunologia tumoral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MIP-1α (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccl3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccl3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccl3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MIP-1α.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccl3 para a investigação da sinalização de MIP-1α, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccl3 críticos para a função MIP-1α
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccl3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MIP-1α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MIP-1α Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccl3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MIP-1α Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MIP-1α (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccl3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccl3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.