Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Mimitin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410509-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MimitinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Mimitin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Mimitin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NDUFAF2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Mimitin Anticorpo (H-11): sc-365592
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Mimitin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410509-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Mimitin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410509-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NDUFAF2 (Mimitin) é um fator de montagem na matriz mitocondrial, necessário para a biogênese adequada do complexo I da cadeia respiratória (NADH:ubiquinona oxidoredutase). Ao apoiar a maturação e a estabilidade do complexo I, a Mimitin contribui para a fosforilação oxidativa, para a manutenção do potencial de membrana mitocondrial e para o controlo do equilíbrio redox celular, que influencia vias metabólicas e de resposta ao stress. A perturbação da montagem do complexo I pode aumentar as espécies reativas de oxigénio e comprometer a produção de ATP, associando a disfunção de NDUFAF2 à fisiopatologia mitocondrial e a tecidos com elevada exigência energética. Como regulador da função mitocondrial codificado no núcleo, o NDUFAF2 é frequentemente estudado em contextos de remodelação metabólica, controlo de qualidade mitocondrial e mecanismos subjacentes a doenças associadas ao complexo I.
Mimitin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NDUFAF2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NDUFAF2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NDUFAF2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NDUFAF2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.