Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MGMT 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400720-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- MGMT Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- MGMT 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 MGMT 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 MGMT을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 MGMT Antibody (E-1): sc-166528
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
MGMT 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400720-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MGMT 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400720-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O6-메틸구아닌-DNA 메틸트랜스퍼레이스(MGMT)는 직접 DNA 복구 효소로, 구아닌의 O6 위치에 형성된 알킬 부가체를 활성부위 시스테인으로 손상을 옮겨 제거하는 단회성(‘자살’) 반응을 통해 복구합니다. 이러한 활성은 지속적인 O6-알킬구아닌 병변으로 인해 발생할 수 있는 잘못된 염기쌍 형성(miscoding)과 복제 과정에서의 이중가닥 절단을 예방함으로써 유전체 무결성을 보호합니다. MGMT는 복제 스트레스 및 알킬화 손상의 불일치 복구(mismatch repair) 의존적 처리와 맞물려 작동하는 더 넓은 DNA 손상 반응 및 복구 네트워크 내에서 기능합니다. MGMT 발현 변화 또는 프로모터 메틸화는 알킬화 손상에 대한 세포 반응을 좌우하는 요인으로 널리 연구되며, 종양 생물학, 돌연변이 시그니처, 그리고 DNA 복구 경로 간 상호작용과도 관련이 있습니다.
MGMT 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 MGMT 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 MGMT 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 MGMT의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, MGMT 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.