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mGluR-3双切口酶质粒(h) | sc-404012-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mGluR-3双切口酶质粒(h2) | sc-404012-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRM3 编码代谢型谷氨酸受体 3(mGluR-3),属于 C 类 GPCR,主要与 Gi/o 蛋白偶联,从而抑制腺苷酸环化酶活性并调控 cAMP 依赖性信号传导。mGluR-3 通过影响突触前神经递质释放并塑造突触后兴奋性来调节突触传递与可塑性,其下游还会影响 MAPK/ERK 等第二信使通路。在中枢神经系统中,mGluR-3 在神经元和胶质细胞群体中均有表达,参与谷氨酸稳态维持以及神经炎症相关信号。遗传学与功能学研究已将 GRM3 相关信号与神经精神疾病及神经退行性疾病的生物学机制联系起来,使其成为研究神经环路功能与细胞应激反应机制的有用靶点。
mGluR-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GRM3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GRM3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GRM3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GRM3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。