Metaxin 3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-415611

Übersicht

MTX3 kodiert Metaxin 3, ein Mitglied der Metaxin-Familie, das mit der mitochondrialen Biologie in Verbindung gebracht wird, einschließlich der Organisation der äußeren Mitochondrienmembran und der Biogenese von Proteinimportkomplexen der Mitochondrien. Metaxine werden mit Prozessen wie dem mitochondrialen Proteintransport, der Aufrechterhaltung der mitochondrialen Integrität und der Koordination des Stoffwechsels mit Stressantworten in Zusammenhang gebracht. Eine gestörte mitochondriale Homöostase ist ein häufiges Merkmal in verschiedensten Krankheitskontexten, wodurch MTX3 ein nützlicher Genort zur Untersuchung von Mechanismen ist, die mitochondriale Dynamik mit Zellüberleben und Differenzierung verknüpfen. Die funktionelle Untersuchung von MTX3 kann dazu beitragen zu klären, wie mitochondriale Importwege nachgeschaltete Signalwege und energieabhängige zelluläre Programme beeinflussen.

Das Metaxin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des MTX3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des MTX3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von MTX3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Metaxin 3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von MTX3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Metaxin 3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf MTX3-Exone abzielen, die für die Metaxin 3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere MTX3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Metaxin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Metaxin 3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des MTX3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Metaxin 3 HDR-Plasmid (h) und Metaxin 3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von MTX3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten MTX3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.