Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Med8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404402
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Med8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Med8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Med8 Anticorpo (A-5): sc-365960
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Med8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404402 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MED8 codifica a Med8, uma subunidade conservada do complexo Mediator que faz a ponte entre fatores de transcrição específicos de sequência e a RNA polimerase II para coordenar o início e o alongamento da transcrição. Por meio de seu papel na integridade do Mediator e na comunicação entre promotores e enhancers, MED8 contribui para a regulação da progressão do ciclo celular, de programas de diferenciação e da expressão gênica responsiva ao estresse. A perturbação de componentes do Mediator pode reconfigurar redes transcricionais que influenciam a estabilidade genômica e o estado metabólico, tornando MED8 relevante para estudos mecanísticos em biologia do câncer e em outros distúrbios impulsionados por desregulação transcricional. Assim, o MED8 humano é um nó útil para investigar vias centrais de controle transcricional e dependências contextuais de regulação gênica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Med8 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MED8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MED8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MED8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Med8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MED8 para a investigação da sinalização de Med8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MED8 críticos para a função Med8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MED8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Med8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Med8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MED8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Med8 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Med8 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MED8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MED8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.