MCT12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407365

概要

SLC16A12は、溶質キャリア16（SLC16）ファミリーに属する膜輸送体であるモノカルボン酸トランスポーター12（MCT12）をコードしており、細胞の代謝恒常性に寄与する小分子有機酸および関連代謝物の膜貫通輸送に関与すると考えられています。膜を挟んだ基質の利用可能性に影響することで、MCT12は乳酸／ピルビン酸の取り扱い、レドックスバランス、ならびに細胞内区画間の代謝カップリングを制御する経路と交差し得ます。SLC16A12機能の変化は、白内障や水晶体生理の変化などの眼表現型と関連づけられており、上皮輸送、代謝物流束、組織特異的な代謝ストレスの研究における重要性を支持します。これらの特性により、SLC16A12は、モノカルボン酸輸送が細胞エネルギー代謝およびバリア／上皮機能とどのように統合されるかを解析するための有用な標的となります。

MCT12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC16A12遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC16A12内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC16A12のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、MCT12タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、MCT12シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC16A12欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• MCT12の機能に不可欠なSLC16A12エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC16A12ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• MCT12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびMCT12 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC16A12遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  MCT12 HDRプラスミド（h）および MCT12 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC16A12ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC16A12標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。