MCH-1R CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402512

개요

MCHR1는 멜라닌-농축 호르몬 수용체 1(MCH-1R)을 암호화하며, MCH 신경펩타이드에 결합하는 class A GPCR로서 에너지 항상성, 섭식 행동, 각성, 기분 관련 과정에 관여하는 신경 신호전달을 조절합니다. 활성화되면 MCH-1R은 주로 Gi/o 및 Gq 경로에 결합하여 세포 내 cAMP, 포스포리파아제 C 신호전달, 칼슘 플럭스, 그리고 ERK/MAPK와 같은 하위 키나아제 연쇄반응을 조절합니다. 수용체 활성은 시상하부 및 변연계 회로 전반에서 시냅스 전달과 신경내분비 출력에 영향을 미칩니다. MCHR1 신호전달의 이상 조절은 비만과 인슐린 저항성을 포함한 대사적 표현형과 연관되어 왔으며, 불안 및 우울 연구와 관련된 신경정신과적 특성과도 관련이 있는 것으로 보고되었습니다.

MCH-1R CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MCHR1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MCHR1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MCHR1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MCH-1R 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MCH-1R 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MCHR1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MCH-1R 기능에 중요한 MCHR1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MCHR1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MCH-1R CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MCH-1R CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MCHR1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MCH-1R HDR 플라스미드 (h) 및 MCH-1R HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MCHR1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MCHR1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.