MATH-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419231
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MATH-2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico MATH-2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:MATH-2 Anticorpo (3G7): sc-517009
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MATH-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419231 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Neurod6 codifica o fator de transcrição básico hélice–alça–hélice (bHLH) MATH-2, um regulador-chave da diferenciação, maturação e sobrevivência neuronal no sistema nervoso em desenvolvimento do camundongo. O MATH-2 influencia programas gênicos que sustentam o crescimento de neuritos, a orientação axonal e a manutenção da identidade neuronal glutamatérgica, coordenando-se com outros fatores proneurais bHLH para moldar os circuitos corticais e hipocampais. Por meio do controle transcricional do destino e da conectividade neuronais, o Neurod6 é relevante para estudos de mecanismos do neurodesenvolvimento e de vias implicadas em fenótipos cognitivos e comportamentais. Redes de diferenciação dirigidas por bHLH desreguladas são comumente investigadas em modelos de transtornos do neurodesenvolvimento e de vulnerabilidade neuronal.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MATH-2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Neurod6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Neurod6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Neurod6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MATH-2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Neurod6 para a investigação da sinalização de MATH-2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Neurod6 críticos para a função MATH-2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Neurod6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo MATH-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo MATH-2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Neurod6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo MATH-2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR MATH-2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Neurod6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Neurod6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.