MARCH8 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428061-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MARCH8O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MARCH8 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MARCH8 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para March8. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MARCH8 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428061-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MARCH8 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-428061-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
March8 codifica a MARCH8, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo RING-CH associada a membranas, que se localiza principalmente em membranas endossomais e do trans-Golgi e regula o tráfego e a degradação, dependentes de ubiquitinação, de múltiplas proteínas de superfície celular e intracelulares. Ao promover a triagem mediada por ubiquitina para degradação lisossomal, a MARCH8 ajuda a controlar a abundância de receptores, as saídas de sinalização imune e o controle de qualidade de proteínas de membrana no sistema endolisossomal. Em modelos murinos, a MARCH8 tem sido associada a vias que governam a apresentação de antígenos, a restrição imune inata de vírus envelopados e a modulação de receptores de sinalização por meio de processos ligados ao sistema ubiquitina–proteassoma e ao lisossomo. A ubiquitinação desregulada e o tráfego de membranas são amplamente relevantes para fenótipos inflamatórios e para interações patógeno–hospedeiro, tornando March8 um locus útil para estudos mecanísticos de regulação imune e homeostase proteica.
MARCH8 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus March8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de March8. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função March8. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com March8 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.