MARCH8 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-405928

개요

MARCH8(막 연관 RING-CH형 핑거 8)는 엔도솜과 세포막 구획에 국소화되는 E3 유비퀴틴 리가아제를 암호화하며, 여러 막단백질의 유비퀴틴화 의존적 분해(턴오버)와 수송(트래피킹)을 조절합니다. 수용체와 수송체의 엔도사이토시스, 리소좀 경로로의 분류, 세포 표면 가용성을 제어함으로써 MARCH8은 항원 제시, 면역 신호전달, 막단백질 품질 관리 경로에 영향을 미칩니다. 또한 바이러스 외피 당단백질의 바이러스 입자 내 도입을 조절하고 바이러스 입자의 감염성을 제한하는 것과 연관되어, 숙주 방어와 막 생물학의 접점에서의 역할을 시사합니다. MARCH8이 관여하는 유비퀴틴 매개 트래피킹 프로그램의 이상 조절은 인간 세포에서 면역 기능 이상 및 병원체–숙주 상호작용 연구와 관련이 있습니다.

MARCH8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MARCH8 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MARCH8 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MARCH8의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MARCH8 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MARCH8 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MARCH8 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MARCH8 기능에 중요한 MARCH8 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MARCH8 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MARCH8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 MARCH8 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MARCH8 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MARCH8 HDR 플라스미드 (h) 및 MARCH8 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MARCH8 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MARCH8 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.