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MAN2C1双切口酶质粒(h) | sc-404066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAN2C1双切口酶质粒(h2) | sc-404066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAN2C1 编码细胞质 α-甘露糖苷酶 2C1,这是一种外切糖苷酶,负责修剪在糖蛋白质量控制以及错误折叠蛋白清除过程中产生的游离寡糖。通过在溶酶体之外处理高甘露糖型 N-聚糖片段,MAN2C1 参与碳水化合物分解代谢,并有助于调控源自内质网相关降解(ERAD)的去糖基化聚糖在细胞内的负荷。MAN2C1 活性的改变会影响蛋白稳态(proteostasis)以及依赖聚糖的信号网络,使该酶与调节细胞应激反应和代谢稳态的通路相关联。在多种人类疾病背景下,糖基化过程及游离寡糖周转的失衡较为常见,因此在糖蛋白加工机制研究中,扰动 MAN2C1 可作为一种有价值的研究手段。
MAN2C1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAN2C1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAN2C1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAN2C1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAN2C1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。