MAN1A1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421551-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MAN1A1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MAN1A1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MAN1A1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Man1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MAN1A1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421551-NIC | 20 µg | $410.00 |
Man1a codifica a alfa-1,2-manosidase do Golgi MAN1A1, uma enzima residente no Golgi que remove resíduos de manose de N-glicanos do tipo alto teor de manose durante a maturação de glicoproteínas. Essa etapa de processamento contribui para o remodelamento de N-glicanos que influencia o dobramento e o tráfego de proteínas, bem como a composição de glicoproteínas na superfície celular, com efeitos a jusante sobre secreção, função de receptores e interações célula–célula. A atividade de MAN1A1 se integra a processos centrais de glicosilação e de controle de qualidade ao longo da via secretória e pode modular a proteostase e a sinalização dependente de glicanos. A N-glicosilação desregulada e a atividade alterada de mannosidases são comumente associadas a fenótipos relevantes para a biologia do câncer, a neurobiologia e a regulação imunológica, sustentando estudos mecanísticos do processamento de glicanos em estados celulares relevantes para doenças.
MAN1A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Man1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Man1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Man1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Man1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.