Plasmide Double Nickase (h) MafG: sc-401959-NIC

MAFG code MafG, un facteur de transcription bZIP de la famille des petits Maf, dépourvu de domaine de transactivation et fonctionnant principalement comme partenaire de dimérisation obligatoire des facteurs de la famille CNC tels que NFE2L2/NRF2 et des protéines BACH. Via ces hétérodimères, MafG se fixe sur des éléments de reconnaissance Maf/éléments de réponse antioxydante afin de réguler les réponses au stress oxydatif, le métabolisme des xénobiotiques, l’homéostasie de l’hème, ainsi que des programmes transcriptionnels plus larges liés au contrôle rédox et à l’inflammation. L’activité de MafG s’intègre à la signalisation KEAP1–NRF2 et influence l’adaptation cellulaire au stress électrophile et métabolique. Une expression dérégulée de MAFG ou une altération de l’équilibre entre petits Maf et facteurs CNC a été associée à des modifications des réseaux de gènes antioxydants et a été observée dans divers contextes pertinents pour la biologie du cancer, la neurodégénérescence et les mécanismes des maladies inflammatoires chroniques.

MafG Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAFG dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAFG. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAFG. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAFG.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.