Mad 3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406722

개요

MXD3(Mad 3)는 기본 나선–고리–나선(bHLH) 류신 지퍼 전사인자로, MYC/MAX/MXD 조절 네트워크 내에서 MAX와 이합체를 형성해 E-box 의존적 유전자 발현을 조절합니다. 일반적으로 전사 억제와 분화 프로그램을 강화하는 다른 MXD 계열 구성원들과 달리, MXD3는 특정 세포 맥락에서 증식과 연관된 전사 상태와 연결되어 세포주기 진행과 계통(라인리지) 결정에 영향을 미치는 것으로 보고되었습니다. 이러한 축을 통해 MXD3는 크로마틴 연관 전사 출력의 양상을 형성하는 신호를 통합하며, 성장 조절 및 발생/발달 조절을 관장하는 경로에 영향을 줄 수 있습니다. MXD3 발현의 변화는 여러 암 관련 전사체 데이터셋에서 보고되었고, 이는 인간 세포에서 종양성 전사 회로와 맥락 의존적 성장 표현형을 연구하는 데 MXD3가 중요함을 뒷받침합니다.

Mad 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 MXD3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 MXD3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 MXD3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Mad 3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Mad 3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 MXD3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Mad 3 기능에 중요한 MXD3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 MXD3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Mad 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Mad 3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 MXD3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Mad 3 HDR 플라스미드 (h) 및 Mad 3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 MXD3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 MXD3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.