mAChR M2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402394-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mAChR M2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mAChR M2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase mAChR M2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHRM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:mAChR M2 Anticorpo (M2-2-B3): sc-33712
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mAChR M2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402394-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mAChR M2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402394-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CHRM2 codifica o receptor muscarínico de acetilcolina humano M2 (mAChR M2), um GPCR acoplado a Gi/o que atenua a atividade da adenilil ciclase, reduz a sinalização de cAMP/PKA e modula a condutância de canais iônicos para regular a excitabilidade celular e a secreção. No tecido cardíaco, contribui para o controle parassimpático da frequência cardíaca e da condução atrioventricular, enquanto no sistema nervoso central molda a transmissão sináptica e a atividade de redes neurais. A sinalização a jusante cruza-se com vias relacionadas a MAPK e PI3K e pode influenciar a homeostase de cálcio e a liberação de neurotransmissores. Alterações na expressão ou na sinalização de CHRM2 têm sido estudadas em contextos que incluem fisiologia relacionada a arritmias, fenótipos neuropsiquiátricos e redes de sinalização colinérgica associadas a tumores.
mAChR M2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHRM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHRM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHRM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHRM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.