mAChR M2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402394

개요

CHRM2는 무스카린성 아세틸콜린 수용체(mAChR) M2 아형을 암호화하며, 이는 Gi/o에 결합된 GPCR로서 아데닐릴 사이클레이스 활성을 억제해 세포 내 cAMP와 그 하위 PKA 신호를 감소시킵니다. mAChR M2는 또한 이온 채널의 전도도를 조절하여 신경 회로에서 막 흥분성과 신경전달물질 방출에 영향을 주고, 심근세포에서는 심박수(chronotropic) 및 수축력(inotropic) 반응을 조절합니다. 이러한 기전을 통해 CHRM2는 콜린성 신경전달, 자율신경 조절, 그리고 더 넓은 GPCR 의존성 신호 네트워크에 관여합니다. 무스카린성 신호의 이상 조절은 연구 환경에서 심장 전기생리학적 표현형과 신경정신 및 인지 과정과 연관되는 것으로 보고되어, CHRM2는 경로 분석을 위한 유용한 노드로 여겨집니다.

mAChR M2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CHRM2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CHRM2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CHRM2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 mAChR M2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 mAChR M2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CHRM2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• mAChR M2 기능에 중요한 CHRM2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CHRM2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• mAChR M2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 mAChR M2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CHRM2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  mAChR M2 HDR 플라스미드 (h) 및 mAChR M2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CHRM2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CHRM2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.