MACF1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418945

개요

Macf1는 미세소관–액틴 교차결합 인자 1(Microtubule Actin Crosslinking Factor 1, MACF1)을 암호화하며, MACF1은 미세소관을 액틴 세포골격과 기계적·기능적으로 연결해 세포 극성, 이동, 세포내 수송을 조율하는 큰 스펙트라플라킨(spectraplakin) 단백질입니다. 마우스 세포에서 MACF1은 국소부착(focal adhesion)의 턴오버와 세포골격 재구성을 지원하며, Axin 복합체 역학을 조절함으로써 Wnt/β-카테닌 신호전달과도 연관되어 세포골격 의존적 신호 출력에 영향을 미치는 것으로 알려져 있습니다. MACF1은 액틴과 미세소관 네트워크를 통합함으로써 신경 발달, 표피 및 장 조직의 구조화, 그리고 기계적 자극에 대한 반응에 기여합니다. MACF1과 연관된 세포골격 프로그램의 조절 이상은 신경발달 관련 표현형, 장벽 무결성, 그리고 암 생물학 모델에서의 전이 유사 이동 행동 등과 같은 맥락에서 연구되어 왔습니다.

MACF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Macf1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Macf1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Macf1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 MACF1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 MACF1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Macf1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• MACF1 기능에 중요한 Macf1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Macf1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• MACF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 MACF1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Macf1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  MACF1 HDR 플라스미드 (m) 및 MACF1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Macf1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Macf1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.